摘 要： 在志愿者皮肤斑贴受试物或物理性性损伤皮肤后，比较了TEWL仪（Tewamter TM210）与其他几种仪器如Minlta色差仪，电导仪(Skicon 200)和电容仪（ Comeometer CM820）在检测皮肤损伤的敏感性。结果表明，TEWL仪在检测低皮肤刺激性上优于其他的仪器检测，TEWL的增加能敏感地反映由于皮肤屏障破坏而造成的皮肤刺激作用。 关键词：化妆品；皮肤刺激；仪器评价；表皮蒸发水分总量 随着化妆品市场的竞争不断上升，使产品拥有更多的消费人群，产品的安全性与其美容功效一样，均不能被忽视。除了进行人体外和动物实验外，许多大公司开展人体皮肤斑贴试验在筛检配方安全性方面已作为常规。由于24h或48h的人体斑贴试验肉眼观察反应，还不能有效地预测许多化妆品产品或配方在正常使用情况下对皮肤的弱刺激作用，许多学者试建立敏感的仪器检测指标来评价皮肤刺激作用[1~4]。其中，比较认可的是测定通过表皮蒸发水分总量（TEWL）。大多数物质对皮肤的不良作用是通过损伤皮肤屏障。皮肤屏障很重要的功能之一是防止体内水分的丧失。当屏障损作时，水分通过表皮蒸发（丧失）增加。TEWL测定可以了解或预测外来因素对皮肤损伤程度。结合人体皮肤斑贴试验，本文比较了TEWL与其他几种仪器检测指标在评价皮肤损伤方面的敏感性。 1 研究方法 1.1 人体皮肤斑贴试验 利用Finn斑贴小室在健康受试者（25岁~46岁）前臂内侧皮肤一次封闭斑贴受试物24h或48h，去除斑贴后0.5h肉眼观察红斑反应，1h后用不同仪器检测斑贴处皮肤水合状况。 1.2测定TEWL 利用Tewameter TM210仪测定皮肤表面水分蒸发速率。检测指标结果表示TEWL（g/m2·h）。正常情况下，由于有效的皮肤屏障，皮肤内水分通过表皮蒸发或丧失（TEWL）相当低。TEWL增加表明屏障损伤，皮肤受刺激作用。 1.3测定红斑色度 用Minolta色差仪测皮肤斑贴处红斑色度[1]。在相当接近白天光照条件下，据CIE色彩系统将测得的红斑色值转化为标准的三刺激值：L*a*b*，其中a*变化反映红斑色度，a*值大，表明皮肤红斑反应强。 1.4 测定皮肤表面溻导性 利用 Skicon200仪测定皮肤表面电导性。测定结果以电导率（Ω-1）表示。皮肤内有极性的生物膜结构使皮肤成为具有高度隔室的组织，由生物膜作为边界形成的微小解剖结构相当于电容。当皮肤损伤时，破坏了这些微小结构，可以引起能反映皮肤损伤的电阻抗下降，电导率相应增加。 1.5 测定皮肤表面水合状况 利用Comeometer CM820仪测定皮肤表面的电容量。由于水有很好的电解常数，通过测试探头与皮肤接触后电容值的变化，反映皮肤表面水合状况。 1.6 物理性皮肤屏障损伤 受试者两臂内侧皮肤用 2结果 2.1 TEWL 与色度a*值在检测皮肤损伤敏感性比较钠（SLS），去斑贴后0.5h肉眼观察红斑反应，1h后测TEWL和a*值（见表1）。结果表明，在红斑反应不明显时，与SLS浓度有明显的剂量关系（r=0.90）. 表1SLS斑贴24h后TEWT和a*与肉眼观察红斑反应（n=6）SLS浓度 TEWL/g·m-2*h·h 0.5 12.25±6.44 7.10±1.16 +/- 1 0.25 11.83±4.96
7.85±1.96 +/-
20.125 8.23±3.71 7.80±1.31 +/- 20（对照） 6.05±2.29 6.52±0.81 - 6 注：*均表现为红斑可疑反应（+/-） 2.2TEWL 与电导和电容值测定皮肤损伤敏感性比较 受试者一次封闭斑贴受试样品48h，去除斑贴后1h同时测定皮肤表面TEWL、电容值和导电率，结果见表2，仅TEWL与红斑反应强度密切相关（r=0.89P＜0.01＝。除个别样品外，TEWL与肉眼观察红斑反应无明显关系，不能敏感地反映皮肤受损状况。 2.3TEWL电导率值与人为皮肤屏障损伤关系实验 TEWL在检测皮肤屏障损伤中的敏感性通过胶带粘贴，人为造为皮肤屏障的损伤，TEWL值随着胶带粘贴次数增加而增加。从理论上讲，皮肤屏障损伤影响皮肤内生物膜结构，可使阻抗下降，电导率增大。但在本次实验中，未看到这种趋势，对皮肤屏障损伤的检测敏感性不如TEWL。 3讨论 评价化妆品对人体皮肤的刺激性，最常用的是人体斑贴试验，即一次封闭斑贴受试物24h或48h，然后观察和评价皮肤红斑反应。其优点是比动物实验更为直接地了解产品对人体皮肤的作用，尤其是在封闭斑贴情况下，由于角质层细胞的肿胀而增加皮肤的通透性，皮肤过度水合对刺激物敏感，由此提高检测刺激物的灵敏性。尽管如此，皮肤斑贴试验仍只能检测中等强度的刺激物。因此，有学者提出通过延长斑贴时间或结合仪器检测提高斑贴试验的检测敏感性。 皮肤刺激或致敏与许多因素有关，但最早期和最主要的是皮肤屏的破坏。皮肤屏障除了阻止有害或不需要的外来物质入侵外，另一个功能是防止皮肤水分的丧失。在正常性况下，体内水分持续到达角质层，以两种方式释放到环境：出汗和未察觉的出汗（insensible perspiration），即通过皮肤表皮蒸发（丧失）。角质层对水分贮留能力，可限制TEWL，使使内水分进入皮肤，滞留在表皮（保持皮肤柔软性和弹性）的水分量与通过角质层向外界环境释放的水分量保持动态平衡。当化学物质或物理性创伤损伤角质层的主要两种组成，即角层细胞或其周围的脂质时，均可使屏障作用降低，上述平衡破坏，结果为TEWL增加。鉴于大多数化学物质对皮肤的刺激作用是通过损伤皮肤屏障功能，利用TEWL指标来检测外来物对皮肤的损伤已被广泛应用。本文实验也证实了TEWL依在检测皮肤刺激中的敏感性，优于其他的仪器检测。 |
