张乐之、何华美、李新芳、宋金斗 摘 要: 目的：介绍粉防己碱抗炎作用的研究进展，供进一步研究与开发此药作参考。 方法：检索近年来国内外相关文献并结合本室研究工作进行分析、评述。 结果：粉防己碱对全身和局部的多种急、慢性炎症、免疫性炎症、烟雾吸入性肺损伤、四氯化碳性肝损伤有显著的抑制作用，其抗炎作用是多方面的，包括抑制炎症细胞功能、抗自由基损伤、抑制炎症介质释放或对抗炎症介质的效应，其作用机制可能主要是干扰了细胞的信号转导系统。 结论：粉防己碱可抑制炎症反应的多个环节，具有良好的抗炎效果，没有明显毒性，值得进一步研究与开发。 关键词：粉防己碱；抗炎作用；炎症介质；信号转导 炎症是临床最为常见的病理过程之一，因此抗炎药物的研究具有重要的治疗学意义。半个世纪以来，人们以糖皮质激素为代表的甾体类药物和以水杨酸为代表的非甾体类药物治疗炎症性疾病，但由于这两类药物均存在明显的不良反应而限制了它们的临床应用。故而研制疗效好、不良反应小的新型抗炎药物成为该领域的热门课题。 粉防己碱（Telran-drine，汉防己甲素），又称汉防己甲素，是从中药防己科植物粉防己根中提取的生物碱，为双苄基异喹啉衍生物。我室近年来的系列研究证明：粉防己碱可抑制炎症过程的多个环节，具有良好的抗炎效果。现结合国内外文献作一综述。 1 粉防己碱对炎症模型的作用 近年的实验证明，粉防己碱对多种炎症模型有明确的防治作用。 1.1 巴豆油所致的急慢性炎症 粉防己碱40mg/kg，ig，qd×7d能明显抑制注射巴豆油所致的大鼠皮下气囊肿。粉防己碱20mg/kg，ig，能显著抑制涂抹巴豆油所致的小鼠耳廓水肿。 1.2 佐剂性关节炎和肉芽肿 粉防己碱80mg/kg/d，ig，qd×7d可明显抑制关节炎的发展，作用强于阿司匹林。我室研究表明，粉防己碱40mg/kg，ig，能明显抑制皮内注射完全佛氏佐剂所形成的大鼠原发性关节炎，于佐剂致炎后第8d起，粉防己碱40mg/kg，ig，qd×10d，亦能显著抑制佐剂继发性关节炎,完全佛氏佐剂小鼠背部肉芽肿性炎症模型，粉防己碱7.5～30mg/kg，ig剂量依赖地抑制肉芽组织增生、肉芽内血管形成、炎症细胞浸润和液体渗出，其作用与氢化可的松相似而弱。 1.3 大鼠角叉菜胶性胸腹膜炎 于角叉菜胶致炎前30min和致炎后4h，粉防己碱10～80mg/kg，ig，致炎后8h胸膜腔内渗液量、蛋白渗出量和炎症细胞游出数呈剂量依赖性地减少。于致炎前30min，粉防己碱20～80mg/kg，ig，亦能明显减少致炎后4h胸膜腔内渗液量和白细胞游出数。于致炎前30min，粉防己碱40mg/kg，ig，能显著减少致炎后3h腹腔渗液量、渗出液中依文思蓝含量和白细胞渗出量。 1.4 兔烟雾吸入性肺损伤 于致伤后，粉防己碱12.5mg/kg，iv,能减少烟雾吸入伤家兔支气管肺泡灌洗液中白细胞数量，减轻肺组织水肿及炎症细胞浸润，减轻肺泡巨嗜细胞体积增大，伪足增多和溶酶体排空等病理变化。 1.5 四氯化碳性肝损伤 粉防己碱10nmol/L～1μmol/L可明显抑制四氯化碳所致的肝细胞存活率下降，降低肝细胞脂质过氧化产物的含量和LDH活性，表明粉防己碱有明确的抗肝细胞损伤作用。 1.6 小鼠局部烫伤性炎症 我室自制的4%粉防己碱软膏局部使用，剂量依赖地抑制烫伤引起的血管通透性增加，促进伤口愈合，使伤口结痂、脱痂及完全愈合时间较对照组提前。 1.7 大鼠过敏性气道炎粉防己碱30mg/kg，ig bid×3d，可抑制卵白蛋白1mg致敏大鼠吸入抗原后6h或24h肺罐洗液中的白细胞数量增多，明显减轻细支气管和小血管周围嗜酸性细胞浸润及管壁水肿。 1.8 家兔实验性葡萄膜炎和前色素膜炎 粉防己碱50mg/kg和地塞米松5mg/kg，ip，治疗牛血清白蛋白诱发的家兔实验性葡萄膜炎8d，能显著降低眼部炎症反应、房水蛋白含量、血清免疫复合物和外周T淋巴细胞转化率。停止给药后4d，地塞米松组房水蛋白和血清免疫复合物再度升高。粉防己碱组虽有升高，但比地塞米松组明显为低。病理学检查发现粉防己碱组脉络膜炎症比对照组明显为轻。粉防己碱50mg/kg，ip能显著抑制晶体蛋白引起的家兔前色素膜炎的发生，抑制白细胞的渗出。病理学检查发现虹膜的炎症反应明显减轻。 1.9 实验性矽肺 在大鼠矽肺实验中，粉防己碱18mg/kg3/周×4，可明显抑制二氧化硅引起的肺泡巨噬细胞呼吸爆破及肺部纤维化的形成，减轻肺部损伤和蛋白质渗出，抑制LDH、磷脂和脯氨酸含量增加以及抑制胶原合成和矽结节的产生。 2 粉防己碱对炎症细胞的作用 2.1 抑制吞噬细胞功能 炎症反应时，活化的中性粒细胞通过聚集与血管内皮细胞粘附，通过脱颗粒释放活性蛋白酶、胶原蛋白酶等多种溶酶体酶破坏大分子物质及细胞结构，通过释放氧自由基及炎症介质加重组织破坏，称为中性粒细胞依赖性组织损伤。粉防己碱0.5～10μg/m不仅能抑制中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞的游走、趋化和粘附，并能降低其吞噬功能，在不影响细胞膜完整性的浓度（1～10μg/ml）下，粉防己碱可阻滞中性粒细胞的呼吸爆发、脱颗粒和分泌氧活性成分。本室研究也证明粉防己碱20～80mg/kg ip能抑制中性粒细胞激活、游走并减少溶酶体酶和氧自由基的合成释放，从而减轻组织损伤和炎症反应。粉防己碱0.1～100μmol/L可浓度依赖地抑制小鼠腹腔巨噬细胞和豚鼠肺泡巨噬细胞游走。粉防己碱50μg/ml可抑制培养的肺泡巨噬细胞生长。 2.2 抑制血小板聚集释放 炎症时多种炎性刺激物和释放入血的血小板活化因子（PAF）等炎症介质，可使血小板活化并释放出5-HT、LTB4等炎症介质。同时，血小板发生凝聚形成活性物质，吸引炎症细胞浸润，释放出ADP、PGG2、TXA2等内源性血小板激活物，血小板凝聚作用不断自我放大。粉防己碱50mg/kg ig，可明显抑制ADP、胶原、凝血酶诱导的大鼠血小板聚集反应，其作用强于等剂量阿司匹林和牛磺酸。粉防己碱20μg/ml对PAF、胶原、凝血酶、肾上腺素和ADP诱导的人血小板聚集反应也有明显的抑制作用。本室研究表明，粉防己碱4～10μmol/L不仅明显抑制卡西霉素和PAF诱导的兔血小板凝聚，同时浓度依赖地抑制兔血小板释放PAF，粉防己碱12.5～200μg/ml可浓度依赖地抑制ADP、花生四烯酸和胶原诱导的血小板聚集，电镜下观察到粉防己碱50μg/ml可保护血小板形态的完整，抑制致密颗粒和小颗粒的释放。 2.3 抑制肥大细胞功能 粉防己碱250μmol·L-1能抑制A23187或天花粉诱导的大鼠肥大细胞脱颗粒及释放组胺，同时抑制肥大细胞动员及利用内源性钙。 2.4 抑制淋巴细胞功能 粉防己碱1mg·kg-1ip连续7d可选择性抑制大鼠淋巴细胞增殖、分化和B淋巴细胞合成抗体。在体外，粉防己碱3～30μmol/L对丝裂原诱导的淋巴细胞转化、混合淋巴细胞反应和NK细胞的细胞毒作用也有明显的抑制作用，且其作用强于小檗碱。 3 粉防己碱对炎症介质的作用 炎症介质直接介导炎症反应并引起组织损伤。粉防己碱不仅可抑制多种炎症介质的释放，也可直接对抗某些炎症介质的作用。 3.1 花生四烯酸代谢产物 花生四烯酸经环氧酶代谢生成前列腺素类（PGs）和血栓素类（TXs），经脂氧酶代谢为白三烯类（LTs）。炎症反应时多种炎症细胞皆可产生PGs，TXs和LTs，三者均有较强的致炎作用。 粉防己碱可抑制PGs、TXs和LTs释放并对抗其致炎作用。在体外实验中，粉防己碱浓度依赖地抑制脂多糖和γ-干扰素刺激小鼠腹腔巨噬细胞合成释放PGE2，抑制卡西霉素诱导兔多形核白细胞合成LTB4和TXA2，抑制培养的单核细胞合成PGE2和LTC4、LTD4、LTE4。 在活体实验中，给正常家兔粉防己碱10mg/kg，iv，可抑制中性粒细胞产生LTB4和TXB2；在兔重度烟雾吸入伤模型，于伤后，粉防己碱7.5mg/kg，iv可明显抑制中性粒细胞及肺泡巨噬细胞合成LTB4；在晶体蛋白诱导的家兔前色素膜炎模型，粉防己碱50mg/kg，ip，可降低虹膜中PGE的总量；在角叉菜胶性大鼠胸膜炎模型，粉防己碱20～80mg/kg，ig，可抑制中性粒细胞合成PGE2和LTB4。粉防己碱对上述炎症介质的作用可能是其抑制了磷脂酶A2（PLA2）活性，减少环氧酶和脂氧酶两条途径的底物花生四烯酸（ArachidonicAcid，AA）释放的结果。 3.2 细胞因子 细胞因子是各类细胞所产生的活性蛋白和多肽，其种类繁多，作用广泛。肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素类（ILs）是其中最为重要的两种，二者在炎症反应中起重要作用，可引起发热、急性期蛋白渗出、白细胞游走和粘附增强等。 结扎狗心脏冠状动脉前，粉防己碱3mg/kg iv，可明显降低缺血再灌注后炎症白细胞TNF和IL-1水平。粉防己碱1～10μg/ml可明显抑制单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞产生释放IL-1和TNF，其作用强于小檗碱6～8倍。 在体外粉防己碱12.5μmol/L抑制鼠IL-5的活性达95%，粉防己碱6μmol/L抑制人IL-6的活性达86%。 本室研究证明粉防己碱0.1～100μmol/L浓度依赖地抑制内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞释放TNF和IL-1，4%的粉防己碱自制软膏可抑制烫伤后小鼠皮肤中IL-1和TNF含量的增加。粉防己碱20～30mg/kg，ig连续3d亦可直接抑制IL-1和TNF诱导的大鼠皮下气囊肿炎性白细胞浸润。本室研究还发现，预先给小鼠皮下注射粉防己碱6.25～25.0mg/kg可显著抑制重组IL-8诱导的中性粒细胞向腹腔游走。 3.3 血小板活化因子 血小板活化因子（PAF）是血小板、肥大细胞、巨噬细胞等产生的磷脂类炎症介质，它可扩张血管,增加血管通透性（比组胺强1000～10000倍），引起血浆和蛋白渗出，造成组织水肿，并能诱导中性粒细胞聚集、脱颗粒及释放溶酶体成分，使LTC4和氧自由基产生增多。 粉防己碱0.1～100μmol/L亦可浓度依赖地抑制内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞释放PAF。结扎狗心脏冠状动脉前，粉防己碱3mg/kg，iv,可明显降低缺血再灌注后炎症白细胞PAF水平。粉防己碱20～30mg/kg，ig连续3d对PAF诱导的炎症细胞浸润亦有直接的抑制作用，且其作用强于小檗碱。 3.4 组胺 组胺是炎症早期由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生的一种重要的炎症介质，具有扩张血管、增加血管通透性和收缩血管平滑肌等作用，它也是一种重要的炎症调节介质,可使巨噬细胞活化，并调控各种细胞因子的产生。粉防己碱20μg/ml对大鼠肥大细胞释放组胺有明显的抑制作用，其作用强度与茶碱和色甘酸钠相当。粉防己碱1.5%药液气雾吸入或30mg/kg，ig，亦可对抗组胺引起的豚鼠哮喘。 本室自制的4%粉防己碱软膏治疗小鼠皮肤严重烫伤，可使皮肤中组胺含量显著降低。 3.5 磷脂酶A2 磷脂酶A2（PLA2）是细胞合成释放PGs、TXs、LTs、PAF和氧自由基及溶血磷脂等炎症介质的关键酶,其本身也是一种重要的炎症介质，可直接引起和/或加重炎症反应，也可通过增加血管通透性，诱导炎症细胞脱颗粒引起或加重炎症反应。 我们的实验证明，粉防己碱20～80mg/kg，ig,能剂量依赖性地抑制PLA2活性，其机制与粉防己碱降低细胞内游离钙浓度和钙调素活性有关。 4 抗氧化损伤作用 在炎症时，尤其是吞噬细胞需氧杀菌过程中会产生较多的氧活性成分，但此时其清除剂超氧化物歧化酶（SOD）活性下降，因此活性氧在细胞内积聚引起细胞损伤，加重炎症反应。粉防己碱3～100μmol/L可浓度依赖地抑制由Fe2+诱导的生物膜过氧化作用，从而保护细胞膜不受损伤。粉防己碱1～10μg/ml既可抑制中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞磷酸己糖通路，减少过氧化氢和超氧阴离子的产生，抑制特异性颗粒内β-葡萄糖醛酸酶释放，也可清除捕获自由基。 5 粉防己碱对信号转导系统的作用 细胞的信号转导是一个复杂的网络系统。各种生理信号的转导是通过各类激素与相应的受体结合，形成第二信使物质，后者再把信号传递给效应酶，从而产生各类生理反应。 目前公认的第二信使物质有细胞内钙，三磷酸肌醇（IP3）和cAMP3种，它们相互作用，相互影响，协同完成对信号的传递。 各种炎症信号如炎症介质的产生、释放及效应的发生等，无一不是通过信号传导系统来完成的。 5.1 粉防己碱对细胞内游离钙浓度的影响 细胞内游离钙（[Ca2+]i）是调节细胞各种生理功能的一个关键信使。其与钙调素（CaM）结合形成具有活性的Ca2+-CaM复合物。它可直接激活一些蛋白激酶，又可调节IP3和cAMP的产生。 本室研究表明，粉防己碱7.5mg/kg iv可降低家兔烟雾吸入性损伤后血浆中性粒细胞内游离钙浓度、粉防己碱10～80mg/kg ig，可降低角叉菜胶致炎后大鼠胸膜腔炎症白细胞和腹腔巨噬细胞内游离钙浓度。粉防己碱的这种作用与其阻滞钙通道从而抑制细胞外钙内流有关。 应用膜片钳技术已经证实粉防己碱3～100μmol/L对T和L型钙离子通道均有明显的阻滞作用。 5.2 粉防己碱对磷脂酰肌醇代谢的影响 粉防己碱5～50μg/ml以时间和剂量依赖方式抑制ConA刺激的人淋巴细胞磷脂肌醇代谢使磷酸肌醇的总量减少同时降低胞浆Ca2+浓度和蛋白激酶C活性，即抑制了以磷酸肌醇分解产物IP3和二酰甘油为第二信使的跨膜信号传导系统。由于该信号系统广泛存在于各种器官和组织的细胞中，粉防己碱抑制此系统可能是其广谱抗炎作用的共同机制。 5.3 粉防己碱对细胞内cAMP浓度的影响 粉防己碱20～100mg/kg，ig，可使大鼠胸膜炎炎症白细胞内cAMP的浓度升高。在体外，粉防己碱100～300μmol/L能抑制钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶的活性，粉防己碱12.5～100μmol/L浓度依赖地升高大鼠胸膜炎渗出液中中性白细胞腺苷酸环化酶活性。 以上结果提示，粉防己碱可能通过激活腺苷酸环化酶活性使cAMP合成增多，通过抑制磷酸二酯酶活性使cAMP降解减少，二者共同导致细胞内cAMP水平升高。 6 评价与展望综上所述，粉防己碱是一种广谱抗炎药物，对局部和全身的多种急、慢性炎症、免疫性炎症、烟雾吸入性肺损伤、四氯化碳性肝损伤均有显著的抑制作用。 其抗炎作用是多方面的，包括抑制炎症细胞功能、抗自由基损伤、抑制炎症介质释放或对抗炎症介质的效应，其作用机制可能主要是通过抑制细胞内游离钙浓度升高，抑制磷脂酰肌醇代谢并增加细胞内cAMP水平，从而干扰跨膜信号传递。 动物实验表明，粉防己碱没有明显毒性，没有甾体类抗炎药物的激素样副作用，可长期使用，临床长期应用粉防己碱治疗高血压等病症时未见引起严重不良反应，也没有因副作用而中断治疗者。因此，粉防己碱有可能成为一类新型的抗炎药物，值得进一步研究与开发。 参考文献：略 湖州浙星生物科技有限公司是国内最专业的化妆品用汉防己甲素（粉防己提取物）供应商，汉防己甲素具有抗敏、消炎、镇痛、消肿、调节肌肤免疫之功效，可适用于各类宣传抗敏修复功效之产品，产品性状为无色透明水溶性液体，使用方便，添加量小，效果明显。 抗敏产品终极解决方案，浙星科技汉防己甲素！ 化妆品用汉防己甲素，抗敏、消炎、镇痛、消肿，调节皮肤免疫！ 非激素，水溶性好，使用方便，品质稳定，性能卓越，详情请点击此处！ 湖州浙星生物科技有限公司 上海浙星新型材料科技有限公司
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