粉防己碱对创面修复组织中一氧化氮和一氧化氮合酶的影响 刘德伍、李国辉、刘德明 一、材料与方法 1、动物模型及分组：健康成年新西兰白兔（江西省医学实验动物中心）30只，雌雄各半，体重（2.30±0.20）kg。 实验前适应性喂养2d，用氯胺酮50mg/kg、安定2mg/kg肌肉注射麻醉。于每只兔的双耳腹侧各做两个边长 2.样品处理及检测指标： （1）一氧化氮（NO）含量测定：采用硝酸还原酶法，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 （2）一氧化氮合酶（NOS）活性测定：采用血红蛋白氧化法。NOS以左旋精氨酸（L-Arg）为底物，催化NO与氧合血红蛋白（HbO2）反应生成高铁血红蛋白，在530nm波长下测定吸光度（A）值。 （3）羟脯氨酸（HPr）含量测定：采用氯胺-T氧化法，用DU640型核酸蛋白分析仪于波长562nm下测定A值。根据上述试剂盒说明书，将所测A值转换为相应的单位值。 二、结果 NO含量、NOS活性、羟脯氨酸含量测定结果见表1～3。
三、讨论 在机体创伤修复过程中，皮肤内源性NO被大量释放入受损的局部组织，直接或与其他因子相互作用，参与创面修复与瘢痕形成过程，提示调节NO含量及NOS活性可能有助于控制创伤的修复。 本实验结果显示，粉防己碱与NO含量和NOS活性在创伤修复过程中表现为剂量依赖性。低浓度粉防己碱组在创伤初期的3—7d中，羟脯氨酸含量较对照组明显增高，在创伤初期能够发挥促进兔耳创面修复的作用;较高浓度的粉防己碱组羟脯氨酸含量反而偏低，创面愈合时间延长。其原因可能是皮肤创伤后机体产生多种炎症介质，它们既介导早期炎症反应对组织的损害，也参与组织的修复过程。 粉防己碱具有抗炎作用，可抑制炎性细胞趋化、黏附和炎症介质的释放。小剂量粉防己碱在创伤初期可抑制NO等过度表达，可减轻对组织的损害;剂量过大时在创伤后期也表现为抑制组织修复。 Efron等利用鼠皮下埋植聚乙烯乙醇海绵的创伤模型，向伤口注入选择性诱生型NOS抑制剂（S-methylisothiourea），结果能够减少NO的产生并降低海绵内羟脯氨酸含量。笔者分析，粉防己碱可能通过降低NO水平进而降低细胞毒作用和延缓组织纤维化进程。NO的双重作用除了与自身复杂的理化及生物学特性有关外，还受内环境氧化还原状态、NOS的类型以及与其他因子相互作用的影响，因此研究结果容易出现多样性和复杂性，尚有待于今后进一步探讨。 参考文献：略 |
